讨 论<?xml:namespace prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" /> 我们建立的维库溴铵血药浓度荧光测定法,综合改良了文献报道的方法;使其实验操作步骤简化、结果稳定、回收率亦满意。本法测出的维库溴铵最低血浓度为0.05μg/ml,类似于文献中报道的结果[2-3]。 本测定方法汲取了既往文献报道方法的可取之处:①选用四氯四碘荧光素作为荧光显示剂。②用氯仿作为有机提取剂。③充分振荡30min,以求提取完全。 我们的主要改进措施是:①提高碳酸氢钠缓冲液的pH值(7.8→10.5);增大缓冲容量(0.1M→0.2M),以保证药物能够在一个稳定的碱性环境中与荧光显示剂充分络合。②实验中发现,有机提取液中酚的去皂化作用小于其降低荧光强度的作用,故去掉酚成分,单纯选用氯仿作为提取剂。③恒温高速离心(10℃,10000转/min),以减少药物的分解,提高分离效果。④增加荧光显示剂的浓度,使其能够与药物充分结合,提高测定的荧光强度。⑤据文献报道,用丙酮作为最后提取液的稳定性不可靠,并可导致被测物的荧光强度降低。故Wingard等[4]在1979年报道的方法中即取消了丙酮,直接测定氯仿提取液,但我们在试验中发现,直接测定提取液,结果极不稳定,而用其他溶剂代替(乙醇)结果亦欠佳。故我们仍在提取液中加入一定比例的丙酮,而且结果稳定,虽然荧光强度有所降低,但属系统误差,可消除。 本方法主要具有以下特点:①具有文献报道方法的主要优点,如线性及敏感性好、分辨率高、回收亦满意。②优于文献报道的方法,如操作步骤简化、方法稳定、重复性好、适于临床和科研应用[5-6]。 参考文献 1. Lien CA. Rational use of muscule relaxants. IARS 1994 Review Course Lectures. Presented at the 68th Clinical and Scientific Contress of the International Anesthesia Research Society, Orlando, Florida, March 5-9,1994,P66-72 2. Kersten UW, Meijer DKF, Agoston S. Fluorimetric and chromatographic determination of pancuronium bromide and its metabolites in biological materials. Clinica Chimica Acta, 1973,44:59-66 3. Rupp SM, Castagnoli KP, Fisher DM, et al. Pancuronium and vecuronium pharmacokinetics and pharmacodynamics in younge and elderly adults. Anesthesiology, 1987,67:45 4. Wingard LB, et al. Modified fluorimetric quantitation of pancuronium bromide and metabolities in human material and unbilical serums. Pharmacent Sci, 1979,68:914 5. Waston MJ. A modified method for the fluorimetric determination of pancuronium bromide in plasma. Clin Chimica Acta. 1977,79:511 6. Ellis N. Fluorescent analysis of d-tubocurarine hydrochloride. J Lab Clin Med, 1963,2:338 孙海燕,女,28岁,中国协和医院大学博士研究生,曾在国内专业杂志发表论文2篇,参加编写专著四部,共计15章35余万字。曾为《现代呼吸道管理学-麻醉与危重症治疗关键技术》和《困难气管插管技术》两部专著副主编。 |